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1、,*,單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,實驗須知,實驗記錄,實驗記錄是在進行科學研究過程中積累資料、經(jīng)驗的一項重要工作，每一次實驗過程中都應當養(yǎng)成良好的習慣，及時做好記錄和總結(jié)。,要求：,真實性 原始性 完整性 條理性,實驗報告的書寫,實驗結(jié)束后，應及時整理和總結(jié)實驗結(jié)果，寫出實驗報告。完整的實驗報告應包括：實驗題目、實驗日期、實驗目的、實驗原理、實驗儀器和試劑、操作步驟、實驗結(jié)果與分析、實驗結(jié)論等項目。,實驗室規(guī)則,上實驗課時不遲到，不早退，自覺遵守課堂紀
2、律，上課時應保持實驗室安靜，不得大聲說笑。進入實驗室必須穿實驗工作服。,實驗課前認真預習有關課程，明確實驗目的、要求和注意事項，熟悉實驗內(nèi)容和方法步驟。,實驗時應遵守實驗操作規(guī)程，按教師要求，認真操作。要細心觀察實驗現(xiàn)象，認真記錄實驗數(shù)據(jù)，作出結(jié)論，最后寫出實驗報告。,要愛護公物，小心使用儀器和實驗設備，注意節(jié)約用水、電、藥品和器材。,所有固體廢棄物如：廢紙、固體廢棄物、沉淀物等必須棄于垃圾桶中。強酸、強堿必須倒入玻璃器皿中，用水稀釋后倒入水槽。,實驗室和實驗臺應保持整潔。公用試劑用畢，立即蓋嚴并還原。實驗完畢，儀器洗凈放好。,在實驗過程中必須遵守操作規(guī)程，不得隨意亂動亂用。如不會使用，應請教
3、指導教師。凡因亂動亂用違反操作規(guī)程而損壞儀器設備，造成事故者，按有關規(guī)定進行賠償和處理。,嚴禁在實驗室內(nèi)吃飯、吸煙、扔廢物和隨地吐痰，實驗結(jié)束離開實驗室之前，關好窗戶，切斷電源，水源，確保安全。,5,實驗室安全,使用玻璃、金屬器材時注意防止割傷及機械創(chuàng)傷。如發(fā)生意外，找實驗室工作人員(少量急用藥物備用)。,濃酸、濃堿腐蝕性很強，必須極為小心地操作。用吸量管量取這些試劑(包括有毒物)時，必須使用橡皮球，絕對不能用口吸取。,微生物、動物的組織、細胞培養(yǎng)物、血液和分泌物 都可能存在細菌和病毒感染的潛在危害，處理生物材料必需小心謹慎，做完實驗必須用肥皂、洗滌劑或消毒液洗手。,被污染的物品，必須進行高壓
4、消毒或燒成灰燼。,被污染的玻璃用具應在清洗和高壓消毒前立即浸泡在適當?shù)南疽褐小?試劑使用規(guī)則,使用試劑前應該仔細辨認標簽，看清名稱及濃度，是否為本實驗所需。,取出試劑后，立即將瓶塞蓋好，放回原位；未用完的試劑決不可倒回原瓶。,取標準溶液時，應該將標準溶液倒入干凈燒杯中，再用干凈吸管吸取標準液，以免污染瓶中的標準液體。,使用滴管時，滴管尖端朝下，避免試劑流入橡皮帽內(nèi)。,使用有毒試劑及強酸強堿時，盡可能用量筒取，若用吸管只能用吸耳球取，切勿用嘴吸取，以免造成意外。,吸量管的使用,正確拿法：中指和拇指拿住吸管上端，食指頂住吸量管頂端。,取液：用吸耳球吸取液體至刻度上，眼睛看著液面上升；吸完后用食指
5、頂住吸量管上端。,調(diào)刻度：吸量管與地面保持垂直，下口與試劑瓶接觸，并成一角度；用食指控制液體下降至最上一刻度處；液體凹面、刻度和視線應在一水平面上。,放液：吸量管移入準備接受溶液的容器中，使其出口尖端接觸器壁，并成一角度，吸量管仍保持垂直。放開食指，使液體自動流出。吸量管應最后靠壁,15,秒。,吸量管上端標有,“,吹,”,字。將所量液體全部放出后，還需要吹出殘留于管尖的溶液。此類吸量管為,“,吹出式,”,，未標,“,吹,”,字的吸量管，則不必吹出管尖的殘留液體。,(0.5ml,以下的都要吹）,吸量管尖應接觸受器內(nèi)壁，但不應插入受器內(nèi)的原有液體之中，以免污染吸量管及試劑。,吸取血液、尿、組織樣品
6、、粘稠試劑或有顏色的吸量管，用后應及時用自來水沖洗干凈。如果吸取一般試劑的吸量管可不必馬上沖洗，待實驗完畢后，用自來水沖洗干凈，晾干備用。,吸量管的使用注意事項,玻璃器皿的一般清洗方法,一般玻璃儀器：如試管、燒杯、錐形瓶等，先用自來水洗刷后，用洗衣粉刷洗，再用自來水反復沖洗，最后用蒸餾水淋洗,2,3,次。干燥備用。,容量分析儀器：吸量管、滴定管、容量瓶等，先用自來水沖洗，待晾干后，再用鉻酸洗液浸泡數(shù)小時，然后用自來水充分沖洗，最后用蒸餾水淋洗,2,3,次，干燥備用。,比色杯：用畢立即用自來水反復沖洗。洗不凈時，用鹽酸或適當溶劑沖洗，再用自來水沖洗。避免用堿液或強氧化劑清洗，切忌用試管刷或粗糙布
7、,(,紙,),擦拭。,上述所有玻璃器材洗凈,(,以倒置后器壁不掛水珠為干凈的標準,),后，根據(jù)需要晾干或烘干。,實驗一、蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)和等電點測定,一、實驗目的,1,、了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì),2,、學習測定蛋白質(zhì)等電點的一種方法,(,沉淀法,),二、實驗原理,蛋白質(zhì)是,兩性電解質(zhì),。在蛋白質(zhì)溶液中存在下列平衡：,蛋白質(zhì)分子的解離狀態(tài)和解離程度受,溶液的酸堿度,影響。,常用方法：利用,溴甲酚綠指示劑,的變色來觀察蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)。,3.8,5.6,當溶液的,pH,為一定值時，蛋白質(zhì)極性基團解離的正負離子數(shù)相等，凈電荷為,0,，此溶液的,pH,值為該,蛋白質(zhì)的等電點,。,不同蛋白質(zhì)具有各自特定
8、的等電點，與該蛋白質(zhì)的組成結(jié)構有關。,在等電點時，蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)都有變化，可利用性質(zhì)的變化測定各種蛋白質(zhì)的等電點。,常用方法,：觀察蛋白溶液在不同,pH,值下的溶解度。,問題：蛋白質(zhì)等電點的測定還有哪些方法,?,本實驗通過,觀察不同,pH,溶液中酪蛋白的溶解度來測定其等電點,。,用醋酸與醋酸鈉（醋酸鈉混合在酪蛋白溶液中）配制各種不同,pH,值的緩沖液。向各緩沖溶液中加入酪蛋白后，,沉淀出現(xiàn)最多的緩沖液的,pH,值即為酪蛋白的等電點,。,三、試劑儀器和試劑,1,、儀器設備,試管及試管架,滴管,吸量管,容量瓶,0.5%,酪蛋白溶液,0.01%溴甲基,酚綠指示劑,0.10 mol/L,鹽酸溶液,0
9、.10,mol/L,氫氧化鈉溶液,1.00 mol/L,醋酸溶液,0.10 mol/L,醋酸溶液,0.01 mol/L,醋酸溶液,2,、試劑,四、實驗步驟與結(jié)果,1,、觀察蛋白質(zhì)的兩性反應,（,2,）觀察其混濁度。靜置,15,分鐘后，再觀察其混濁度。結(jié)果可用“,+,、,+,、,+,”表示渾濁度，,最混濁的一管,pH,即接近酪蛋白的等電點,。,（,1,）取,5,支試管，按書中表格分別加入各試劑，混勻。,2,、測定酪蛋白等電點,實驗結(jié)果：,按照實驗報告要求計算實驗結(jié)果。,分析：,通過操作本次實驗，探討影響本實驗結(jié)果的主要影響因素。,分析實驗成功或失敗的主要原因。,五、實驗結(jié)果與分析,六、實驗結(jié)論,酪蛋白的等電點接近多少？,1,、書上,p202,，三道思考題？,2,、蛋白質(zhì)沉淀測定常用的方法有哪些？,七、思考題,
實驗一、蛋白質(zhì)的等電點測定
