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1、,單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,1,組,張華琛、劉暢、周欣毅,4,組,柳婧、勵夏煒、莫健,3,組,楊夢朝、李鵬程、姚昕,2,組,杜江悅、劉春暉、丁永鋒,7,組,周夢林、嚴芃芃,6,組,陶佳棟、吳卓璇,5,組,高珍珍、任凱達,8,組,李林榮、陳心怡,講臺,B,班,9,組,鄧皓、婁高杰,10,組,顧琰嘉、潘盛警,缺 氧 實 驗,（,Hypoxia Experiment),陸 源,浙江大學(xué)學(xué)院,一、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能抑制和低溫對缺氧的影響討論,常壓乏氧性缺氧實驗的測定指標？,如何保證小鼠處于,常壓環(huán)境？,本實驗采用哪種實驗設(shè)計，目的是什么？,需
2、要控制兩組實驗動物體重、性別？為什么？,本實驗采用哪種統(tǒng)計方法？,本實驗有哪些非處理因素？,耗氧量測定的原理？,從實驗設(shè)計角度看，放置鈉石灰的作用？,本實驗方法可用于哪些研究？,本實驗復(fù)制血液性缺氧動物模型的方法？,本實驗采用哪種實驗設(shè)計方法？,本實驗采用哪種統(tǒng)計描述、顯著性檢驗方法？,動物乏氧性缺氧時的皮膚或粘膜的顏色？為什么？,動物,NaNO,2,、,CO,中毒時的粘膜或皮膚的顏色？為什么？,NaNO,2,中毒的解救方法？機制？,CO,中毒的解救方法？,本實驗方法的研究用途？,二、缺氧動物模型的復(fù)制,討論,類 別,外生殖器與肛門之間,雄 性,距離長，有毛生長，無縱行溝,雌 性,距離短，無毛
3、生長，能見到一條縱行溝,小鼠小鼠捉拿和常用給藥方法,小鼠性別判別,缺氧,指組織供氧不足或用氧障礙，從而引起其代謝、功能以致形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生異常變化的病理過程。,低張性缺氧（,hypotonic hypoxia):,動脈血氧分壓降低引起的組織供應(yīng)不足,血液性缺氧（,hemic hypoxia):Hb,的質(zhì)或量改變,導(dǎo)致血氧容量降低或,Hb,結(jié)合的氧不易釋出所引起的缺氧,循環(huán)性缺氧（,circulatory hypoxia):,組織血流量減少引起的組織供應(yīng)不足,組織性缺氧（,histogenous hypoxia):,組織細胞利用氧障礙所至,1.,學(xué)習(xí)小鼠耗氧量的測定方法,2.,觀察中樞神經(jīng)系統(tǒng)機能抑
4、制和低溫對缺氧的影響,目的,一、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能抑制和低溫對缺氧的影響,The,E,ffect of,C,entral,N,ervous,S,ystem,D,epression and,L,ow Temperature on Hypoxia,1,材 料,(materials),1.2,藥品和試劑 氯丙嗪,(chlorpromazine),、鈉石灰（,soda lime),。,為中樞多巴胺受體的阻斷劑,:,抗精神病、鎮(zhèn)吐、能增強催眠、麻醉、鎮(zhèn)靜作用、阻斷外周,-,腎上腺素受體,降溫作用 抑制體溫調(diào)節(jié)中樞，使體溫降低，體溫可隨外環(huán)境變化而變化,“,人工冬眠,”,：用較大劑量時，置患者于冷環(huán)境中,(
5、,如冰袋或用冰水浴,),，可出現(xiàn)鎮(zhèn)靜、嗜睡、體溫降低至正常以下,(,如,34,或更低,),、基礎(chǔ)代謝降低、器官功能活動減少、耗氧量減低而呈,“,人工冬眠,”,狀態(tài),1.1,動物 體重,24,2,g,ICR,小鼠,(mouse),。,CaO+NaOH+CO,2,NaHCO,3,+CaCO,3,1,材 料,(materials),1.1,動物 體重,24,2,g,的雄性,ICR,小鼠,(mouse),。,1.2,藥品和試劑 鈉石灰（,soda Lime),、氯丙嗪,(chlorpromazine),、生理鹽水。,1.3,裝置 測耗氧裝置（,oxygen consumption gauge,）,2,
6、方法,2.1,常壓乏氧性缺氧測定小鼠,成活時間和耗氧量,2.2,分組,20,只小鼠隨機分為生理鹽水組和氯丙嗪組，生理鹽水組,ip NS 0.1ml/10g,，室溫放置,10,15min,開始實驗；,氯丙嗪組,ip 0.25,氯丙嗪,0.1ml/10g,，冰浴,10,15min,，呼吸頻率,70,80,次,/min,開始實驗。,2.3,觀察指標,2.3.1,耐缺氧時間 記錄密閉測耗氧裝置開始至小鼠死亡時間。,2.3.2,耗氧量 小鼠死亡時，量筒中水的下降量，即為耗氧量。計算小鼠單位體重和時間的耗氧率。,2.5,統(tǒng)計處理 數(shù)據(jù)以,x,s,表示，統(tǒng)計學(xué)分析采用,Students,t,-test,方法
7、,。,3.1,小鼠耐缺氧時間,氯丙嗪組在,125ml,缺氧瓶中的成活時間,x,1,s(s),顯著長于生理鹽水組,x,2,s(s),（,p0.05),，見表,1,。,3.2,小鼠耗氧率,氯丙嗪組在,125ml,缺氧瓶中的耗氧率,x,1,s,(ml/g/s),顯著低于生理鹽水組,x,2,s,(ml/g/s),（,p0.05),。,3,結(jié)果,（,results),4,討論,(discussion),5,參考文獻,(references),復(fù)制乏氧性、血液性缺氧動物模型及,NaNO,2,中毒的解救方法。,觀察不同類型缺氧在缺氧過程中黏膜和血液色澤的變化。,二、缺氧動物模型的復(fù)制,目的,The Esta
8、blishment of Animal Models of Hypoxia,1,材 料,(materials),1.1,動物 體重,24,2,g,的,ICR,小鼠,(mouse),。,1.2,藥品和試劑 鈉石灰（,soda lime),亞硝酸鈉,（,sodium nitrite,),、亞甲基藍,(,美藍）（,methylene blue,，,MB,）、,0.9,NaCl(physiological saline solution),、,CO(carbon monoxide),。,2,方法,(methods),2.1,將,20,只小鼠隨機分為乏氧性缺氧組和一氧化碳組。乏氧性缺氧組小鼠放入含有,5
9、g,鈉石灰的,500ml,密閉瓶中，注入,10ml,空氣；一氧化碳組小鼠放入,500ml,密閉瓶，注入,10ml CO,氣體。,CO,2,方法,(methods),2.2,將,20,只小鼠隨機分為亞硝酸納組和亞硝酸納治療組。亞硝酸納組小鼠腹腔注射,50g/L,亞硝酸納,0.2ml,后即刻腹腔注射生理鹽水,0.2ml,；亞硝酸納治療組小鼠腹腔注射,50g/L,亞硝酸納,0.2ml,后即刻腹腔注射,10g/L,亞甲基藍,0.2ml,。,2,方法,(methods),2.3,記錄實驗前和實驗過程中小鼠行為（掙扎、痙攣）和耳、唇、尾的顏色。記錄,30min,中小鼠死亡數(shù)和死亡小鼠肝臟顏色。,2.4,數(shù)
10、據(jù) 小鼠死亡率用百分率表示，統(tǒng)計學(xué)分析采用,Fisher,確切概率法。,3,結(jié)果,(results),3.1,小鼠一氧化碳中毒的死亡率 一氧化碳,組小鼠,30min,內(nèi)的死亡率（,p,）顯著高于乏氧性缺氧組的死亡率（,p1,）（,p0.05),。,3.2,小鼠亞硝酸鹽中毒的死亡率 亞硝酸鹽,組小鼠,30min,內(nèi)的死亡率（,p,）顯著,亞硝酸鹽加美蘭,組的死亡率（,p1,）（,p0.05),。,表,2,不同類型缺氧肝臟顏色比較,3,結(jié)果,(results),類 別,血液或肝臟的顏色,乏氧性缺氧,一氧化碳中毒,亞硝酸鹽中毒,3.1,乏氧性缺氧死亡的小鼠血液呈暗紅色，,一氧化碳中毒死亡小鼠的血液呈,
第二十六章-抗高血壓藥課件
